1 Western blotting
又称免疫印迹,从细胞提取蛋白质并通过聚丙烯酰胺凝胶电泳将不同大小的蛋白质分开,分类的蛋白质被转移到硝酸纤维素膜或尼龙膜上,然后与特定蛋白标记的抗体(同位素或化学放光物标记)结合,经放射自显影现出带纹,根据带纹的密度可确定蛋白质表达的相对量,广泛应用于基因表达调控的研究。
合作方式:由客户提供目的基因表达质粒和抗体。
技术服务完成后向客户提供详细的实验报告和SDS-PAGE电泳照片。
周期:1个月。
2 GST pulldown
用固相化的、已标记的饵蛋白或标签蛋白(生物素-、PolyHis-或GST-),从细胞裂解液中钓出与之相互作用的蛋白。通过Pull-down技术可以确定已知的蛋白与钓出蛋白或已纯化的相关蛋白间的相互作用关系,从体外传路或翻译体系中检测出蛋白相互作用关系。
合作方式:由客户提供目的基因表达质粒。
技术服务完成后向客户提供详细的实验报告和SDS-PAGE电泳照片。
周期:1个月。
3 免疫共沉淀
在细胞裂解液中加入抗兴趣蛋白的抗体,孵育后再加入与抗体特异结合的结合于Pansobin珠上的金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA),若细胞中有正与兴趣蛋白结合的目的蛋白,就可以形成这样一种复合物:“目的蛋白—兴趣蛋白—抗兴趣蛋白抗体—SPA\|Pansobin”,经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,复合物四组分又被分开。然后经Western blotting法用抗体检测目的蛋白是什么,是否为预测蛋白。这种方法得到的目的蛋白是在细胞内天然与兴趣蛋白结合的,符合体内实际情况,得到的蛋白可信度高。
合作方式:由客户提供已构建好的目的基因表达质粒和抗体。
技术服务完成后向客户提供详细的实验报告和SDS-PAGE电泳照片。
周期:1个月。
4 亚细胞定位
合作方式:由客户提供荧光标记的目的基因表达质粒。
技术服务完成后向客户提供详细的实验报告和荧光共聚焦显微镜照片。
周期:1个月。
5 亚细胞共定位
合作方式:由客户提供双色荧光标记的目的基因表达质粒。
技术服务完成后向客户提供详细的实验报告和荧光共聚焦显微镜照片。
周期:1个月。